免疫酶技術(shù)elisa實(shí)驗(yàn)步驟方法及報(bào)告分析
日期：2023-06-06 13:35:59
以下是一份免疫酶技術(shù)ELISA實(shí)驗(yàn)報(bào)告，供參考。
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
通過(guò)建立ELISA實(shí)驗(yàn)方法，測(cè)定標(biāo)本中特定抗原的含量。
二、實(shí)驗(yàn)材料
96孔板（Nunc Maxisorp）；
非特異性或特異性適配抗體；
特異性酶標(biāo)記抗體；
酶標(biāo)記底物；
標(biāo)準(zhǔn)品或未知樣本。
三、實(shí)驗(yàn)方法
1、板涂覆
取出96孔板，在每個(gè)孔中加入100ul目標(biāo)抗原或標(biāo)準(zhǔn)品，用洗滌緩沖液將其均勻涂覆，室溫靜置過(guò)夜。
2、板洗滌
倒掉孔中液體，向每個(gè)孔中加入200ul洗滌緩沖液，輕輕震蕩10秒，倒掉液體，重復(fù)上述步驟3次。最后將孔中液體倒干，拍干背面。
3、板包被
向每個(gè)孔中加入200ul阻斷緩沖液，室溫靜置2小時(shí)，再將阻斷液體倒掉。
4、孔添加樣本
向每個(gè)孔中加入100ul未知樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，室溫靜置2小時(shí)。
5、板洗滌
將孔中液體倒掉，向每個(gè)孔中加入200ul洗滌緩沖液，輕輕震蕩10秒，倒掉液體，重復(fù)上述步驟3次。最后拍干背面。
6、添加酶標(biāo)記抗體
向每個(gè)孔中加入100ul已經(jīng)稀釋好的酶標(biāo)記抗體，室溫靜置1小時(shí)，注意避免陽(yáng)性對(duì)照污染。
7、板洗滌
重復(fù)步驟5。
8、加底物
向每個(gè)孔中加入100ul酶標(biāo)記底物，室溫靜置10-30分鐘直至顏色顯現(xiàn)。
9、反應(yīng)停止
向每個(gè)孔中加入50ul反應(yīng)停止緩沖液 or ASW，注意反應(yīng)停止緩沖液大小必須要與酶標(biāo)記底物相配套。
10、測(cè)定吸光度
用微孔板閱讀器測(cè)定每個(gè)孔的吸光度值。
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值和未知樣本吸光值，計(jì)算出未知樣本含量。
上一篇： 植物外泌體提取試劑盒哪個(gè)好？
