怎么提高重組抗體的表達量？
日期：2025-05-15 13:39:00
優(yōu)化表達載體：合理設計載體元件，如選擇強啟動子（如 CMV、EF1α ）增強基因轉(zhuǎn)錄，添加有效的終止子保證轉(zhuǎn)錄終止；優(yōu)化 5’和 3’非翻譯區(qū)（UTR），提高 mRNA 的穩(wěn)定性和翻譯效率；引入增強子元件，提升基因表達水平。
選擇合適的宿主細胞：根據(jù)抗體特性和生產(chǎn)需求，篩選高表達、遺傳穩(wěn)定的宿主細胞株。例如，經(jīng)過馴化的 CHO 細胞系更適應無血清培養(yǎng)，能提高表達量和生產(chǎn)效率。
優(yōu)化培養(yǎng)條件：調(diào)整培養(yǎng)基成分，補充合適的氨基酸、維生素和微量元素；控制培養(yǎng)溫度、pH 值、溶氧量等參數(shù)，例如降低培養(yǎng)溫度可減緩細胞代謝速度，延長細胞存活時間，促進蛋白質(zhì)正確折疊和表達；采用分批補料或連續(xù)灌流培養(yǎng)模式，及時補充營養(yǎng)物質(zhì)，去除代謝廢物，維持細胞活性和高表達狀態(tài)。
蛋白質(zhì)折疊與分泌輔助：共表達分子伴侶和折疊酶，幫助抗體正確折疊，減少錯誤折疊和聚集；對信號肽進行優(yōu)化，增強抗體的分泌效率，使其更順利地從細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運到細胞外。
